胱抑素CElisa試劑盒采用雙抗體夾心法進行檢測
胱抑素CElisa試劑盒是一種低分子量的蛋白質(zhì),由人體有核細胞以恒定速率產(chǎn)生,并通過腎小球自由濾過,是評估腎功能的重要指標。胱抑素C ELISA試劑盒作為一種高靈敏度、特異性強的檢測工具,廣泛應用于醫(yī)學研究和臨床診斷中。
胱抑素CElisa試劑盒采用雙抗體夾心法進行檢測。具體步驟如下:
1.包被抗體:微孔板預先包被了特異性抗胱抑素C抗體。
2.加入樣本和標準品:將樣本或標準品加入微孔板中,樣本中的胱抑素C與包被抗體結(jié)合。
3.加入檢測抗體:加入標記的抗胱抑素C抗體,與已結(jié)合的胱抑素C形成免疫復合物。
4.加入酶標記物:加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的鏈霉親和素。
5.顯色反應:加入顯色底物TMB,在HRP催化下顯藍色,加入終止液后變?yōu)辄S色。
6.測量與分析:使用酶標儀在450 nm波長處測量吸光度(OD值),胱抑素C濃度與OD值成正比,通過標準曲線計算樣本中胱抑素C的濃度。
胱抑素CElisa試劑盒特點與優(yōu)勢:
高靈敏度:具有高靈敏度,能夠檢測到低至0.04 ng/mL的胱抑素C。其檢測范圍為0.31-20 ng/mL。
特異性高:該試劑盒特異性識別樣本中的人胱抑素C,與類似物無明顯交叉反應。這確保了檢測結(jié)果的準確性。
重復性好:試劑盒的重復性好,板內(nèi)和板間變異系數(shù)均小于10%。這意味著在不同實驗條件下,檢測結(jié)果具有高度的一致性。
操作便捷:整個檢測過程標準化,操作簡便,通常在3-4小時內(nèi)完成。這使得胱抑素C ELISA試劑盒非常適合高通量檢測。
應用范圍:
1.腎功能評估:胱抑素C是評估腎小球濾過率(GFR)的理想標志物,比肌酐更準確。
2.疾病診斷:胱抑素C水平升高與心血管疾病、代謝綜合征等風險增加相關(guān)。
3.藥物開發(fā):在藥物開發(fā)過程中,胱抑素C可作為生物標志物,用于評估藥物對腎功能的影響。
胱抑素CElisa試劑盒實驗操作注意事項
1.樣本處理:樣本應盡快檢測,如需長期保存,應冷凍于-20℃或-70℃。
2.試劑準備:所有試劑在使用前應恢復至室溫。
3.加樣準確:使用微量加樣器準確加入樣本和試劑,避免氣泡和交叉污染。
4.溫育條件:嚴格按照說明書規(guī)定的溫度和時間進行溫育。
胱抑素CElisa試劑盒憑借其高靈敏度、特異性高、重復性好和操作便捷的特點,已成為檢測胱抑素C濃度工具。它在腎功能評估、疾病診斷和藥物開發(fā)中發(fā)揮著重要作用。通過嚴格遵循操作步驟和注意事項,研究人員和臨床工作者可以獲得準確可靠的檢測結(jié)果,為相關(guān)領(lǐng)域的研究和應用提供有力支持。
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