ELISA試劑盒實驗中誤差的解決辦法
ELISA試劑盒實驗中誤差的解決辦法
ELISA試劑盒注意事項:
1、 不同的試劑盒因工藝和操作方法略有不同,務必按照所用試劑盒嚴格操作,否則容易產(chǎn)生檢測結(jié)果的不確定性.
2、 若不同批號試劑的不同組分(A液或酶工作液),或不同試劑的不同組分進行交叉使用,有可能出現(xiàn)顯色淺或本底高,花板等情形。
3、 加樣時樣品量誤差,對于陰或很陽的標本影響不大,但對閾值附近的標本影響,建議校對加樣器。
4、 反應時間的誤差,做大量標本時,*孔和zui后一孔以及一些特殊標本可能影響較大。
5、 由于滴瓶的精密性肯定不如加樣器,不排除不同滴頭滴量的誤差。另外滴加過程中是否產(chǎn)生氣泡、速度是否均勻,是否顫動等影響液量的因素均可導致以上情況。高標準要求時應使用加樣器。
6、 閾值附近實際上是個灰區(qū)(gray scale),不能截然分為陰性、陽性,國外均要求對這部分可疑標本進行奇數(shù)次復檢,以次數(shù)多者為準,如一次陽兩次陰zui后判為陰,但實際上是否為陰不好說,只有判為可疑,臨床上可以讓患者過一段時間后再測。
7、 肉眼觀察稍顯色,酶標儀打印為陰性的標本在實際工作中是難以避免的,肉眼目測結(jié)果不可靠,應以酶標儀判讀為準。
8、 由陰性變?yōu)閺婈栃栽蚨酁椴僮鬟^程中漏加試劑等有關(guān)。
9、 臨界值附近標本波動為正?,F(xiàn)象,任何ELISA試劑盒均不可避免??梢钥紤]將標本做奇數(shù)次復檢。