白三烯D4Elisa試劑盒樣品收集、處理及保存方法
白三烯D4Elisa試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被小鼠白三烯D4(LTD4)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠白三烯D4(LTD4)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
一、白三烯D4Elisa試劑盒樣品收集、處理及保存方法
1.血清:操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2.血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3.細胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4.組織勻漿:將組織加入適量SHEGN理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5.保存:如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
二、白三烯D4Elisa試劑盒保存:
1.所有試劑均按試劑瓶標簽上所示保存。請注意,收到試劑盒后請盡快將標準品、檢測溶液A、檢測溶液B以及96孔板保存于-20℃。
2.使用后的試劑盒:剩余試劑仍需按照試劑瓶標簽所示的溫度保存,開封后的酶標板要加干燥劑后密封保存于-20℃,避免潮濕。
3.試劑盒內(nèi)酶標條可拆卸,按實驗需求可分多次使用。使用后的剩余試劑盒建議在實驗后1個月內(nèi)使用完畢。產(chǎn)品過期時間以盒子上的標簽為準,保質(zhì)期內(nèi)所有組分都確保是穩(wěn)定的。
三、白三烯D4Elisa試劑盒注意事項
1.于2-8℃保存,有效期6個月。每次使用前應先平衡至室溫。
2.中終止液具有腐蝕性,要小心使用。
3.未使用完的板條應密封保存。
4.瓶蓋每次使用后要擰緊,各瓶蓋之間不可混用。不同批號試劑盒的試劑組份不可混用。
5.白三烯D4Elisa試劑盒試驗樣本應為無染菌、無血脂、無溶血的血清。任何樣本都應視為傳染源妥善處理。
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