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產(chǎn)品展示   ProductsATCC細(xì)胞>>轉(zhuǎn)化細(xì)胞>>肺癌細(xì)胞;0225-02Sp
 
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產(chǎn)品名稱:
肺癌細(xì)胞;0225-02Sp
產(chǎn)品型號(hào):
產(chǎn)品報(bào)價(jià):
產(chǎn)品特點(diǎn):
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  肺癌細(xì)胞;0225-02Sp的詳細(xì)資料:

公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:

產(chǎn)品名稱

生長(zhǎng)特性

貨號(hào)

肺癌細(xì)胞;0225-02Sp

貼壁生長(zhǎng)

EY-X63983

細(xì)胞名稱  肺癌細(xì)胞;0225-02Sp
形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)

特征特性: 該細(xì)胞屬保藏,其特征特性尚未公開。

培養(yǎng)條件: McCoy's5AMedia(ModifiedwithTricine)10%FBS

傳代方法: 1:3~1:8傳代;每周2~5次。

傳代情況: C5

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測(cè): 陰性
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕; 
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
I型前膠原檢測(cè)試劑盒生長(zhǎng)特性: 體內(nèi)生長(zhǎng)培養(yǎng)條件: -Procollagen Type I

L-谷氨脫氫酶檢測(cè)試劑盒生長(zhǎng)特性: 體內(nèi)生長(zhǎng)培養(yǎng)條件: -L-Glutamate dehydrogenase

N2乙酰膽受體IgG檢測(cè)試劑盒生長(zhǎng)特性: 體內(nèi)生長(zhǎng)培養(yǎng)條件: -N2-AChR IgG

N2乙酰膽受體IgG1檢測(cè)試劑盒生長(zhǎng)特性: 體內(nèi)生長(zhǎng)培養(yǎng)條件: -N2-AChR IgG1

N2乙酰膽受體IgG2檢測(cè)試劑盒生長(zhǎng)特性: 體內(nèi)生長(zhǎng)培養(yǎng)條件: -N2-AChR IgG2

Phospho (637)-DRP1檢測(cè)試劑盒生長(zhǎng)特性: 體內(nèi)生長(zhǎng)培養(yǎng)條件: -Phospho

Pim-2原癌基因檢測(cè)試劑盒生長(zhǎng)特性: 體內(nèi)生長(zhǎng)培養(yǎng)條件: -PIM2

pro-MMP-9檢測(cè)試劑盒生長(zhǎng)特性: 體內(nèi)生長(zhǎng)培養(yǎng)條件: -Pro-Matrix metalloproteinase 9

PTEN;MMAC1檢測(cè)試劑盒生長(zhǎng)特性: 體內(nèi)生長(zhǎng)培養(yǎng)條件: -PTEN;MMAC1

Qa淋巴細(xì)胞抗原2檢測(cè)試劑盒生長(zhǎng)特性: 體內(nèi)生長(zhǎng)培養(yǎng)條件: -Qa-2

RAS癌基因家族成員RAB5a檢測(cè)試劑盒生長(zhǎng)特性: 體內(nèi)生長(zhǎng)培養(yǎng)條件: -Member RAS Oncogene Family RAB5a

R-脊椎蛋白2檢測(cè)試劑盒生長(zhǎng)特性: 半貼壁生長(zhǎng)培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSR-spondin-2

S100鈣結(jié)合蛋白A4檢測(cè)試劑盒生長(zhǎng)特性: 半貼壁生長(zhǎng)培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSS100A4

SH3YL1檢測(cè)試劑盒生長(zhǎng)特性: 半貼壁生長(zhǎng)培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSSH3 domain-containing YSC84-like protein 1

TβRII檢測(cè)試劑盒生長(zhǎng)特性: 半貼壁生長(zhǎng)培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSTβRII

USP21檢測(cè)試劑盒生長(zhǎng)特性: 半貼壁生長(zhǎng)培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSUbiquitin carboxyl-terminal hydrolase 21

WNT1可誘導(dǎo)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑蛋白1檢測(cè)試劑盒生長(zhǎng)特性: 半貼壁生長(zhǎng)培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSWISP1
肺癌細(xì)胞;0225-02Sp地膚子皂苷Ic96990-18-0英文名:Momordin Ic  

英文別名:28-Noroleanane, β-D-glucopyranosiduronic acid deriv  

CAS登錄號(hào):96990-18-0

分子式:C41H64O13

分子量:764.93

分子結(jié)構(gòu):

外觀:類白色結(jié)晶粉末

規(guī)格:20mg/支

純度:≥ 98%

用途:用于含量測(cè)定/鑒定/藥理實(shí)驗(yàn)等

提取來源:為藜科一年生草本植物地膚子Kochia scoparia(L.)Schrad 的成熟果實(shí)

熔點(diǎn):238-240℃

藥理藥效:具有清熱利濕、祛風(fēng)止癢等功效,地膚子皂苷Ic(Momordin Ic)為其抗瘙癢,抗炎和抗過敏作用的主要有效成分。

貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光

有效期: 2年
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的  *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

 

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 肺癌細(xì)胞 0225-02Sp
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