公司細胞廣泛用于國內(nèi)院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產(chǎn)品詳細介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
大耳山羊皮膚細胞;LDG-3 | 貼壁生長 | EY-X63766 |
細胞名稱 大耳山羊皮膚細胞;LDG-3
形態(tài)特性: 成纖維細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞系來源于一雄性大耳山羊的皮膚組織。1990年由中國科學院昆明細胞庫建立。
培養(yǎng)條件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS
傳代方法: 1:2;3-4天一次
傳代情況: P5
凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 熒光法(-)
?
冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
β2糖蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 人胚皮膚成纖維細胞;CCC-ESF-1形態(tài)特性: 成纖維細胞樣β2-Glycoprotein
β2糖蛋白1抗體IgA;G;M檢測試劑盒細胞名稱: 人結直腸腺癌細胞;HT-29形態(tài)特性: 上皮樣β2-glycoprotein 1 antibody IgA;G;M
β2整合素檢測試劑盒細胞名稱: 人巨細胞白血病細胞株;Mo7e形態(tài)特性: 圓形integrin β2
β檢測試劑盒細胞名稱: 人非小細胞肺腺癌細胞;NCI-H157形態(tài)特性: 多角β-amylase
β痕跡蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠肥大細胞瘤細胞;P815形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣β-trace protein
γ干擾素誘導蛋白16檢測試劑盒細胞名稱: 中國倉鼠卵巢細胞;CHO形態(tài)特性: 上皮樣interferon-inducible protein 16
阿爾茨海默病相關神經(jīng)絲蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 昆蟲卵巢細胞;SF9形態(tài)特性: 圓形AD7c-NTP
癌基因蛋白質(zhì)p190;bcr-abl檢測試劑盒細胞名稱: 人前列腺癌細胞;PC-3[PC3]形態(tài)特性: 上皮樣p190;bcr-abl
癌癥促凝素檢測試劑盒細胞名稱: 人紅系白血病細胞;TF-1形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Cancer Procoagulant
氨基甲酰磷合成酶2檢測試劑盒細胞名稱: 人導管瘤細胞;UACC812形態(tài)特性: 上皮樣carbamyl phosphate synthetase-2
八聚體結合轉(zhuǎn)錄因子4檢測試劑盒細胞名稱: 人絨癌細胞;JEG-3形態(tài)特性: 上皮樣Octamer Binding Transcription Factor 4
白介素12受體β2檢測試劑盒細胞名稱: 人類原巨核細胞型白血病細胞;UT-7形態(tài)特性: 圓形Interleukin 12 receptorβ2
白介素17受體檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠胚胎成纖維細胞;3T6-Swissalbino形態(tài)特性: 成纖維細胞樣Interleukin 17 Receptor
白介素18受體檢測試劑盒細胞名稱: 白介素-2轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細胞;JEG-3/VP16-IL-2形態(tài)特性: 上皮樣;多角Interleukin 18 Receptor
白介素1β轉(zhuǎn)換酶檢測試劑盒細胞名稱: 人APP-PS1(C410Y)雙基因轉(zhuǎn)染細胞株;7WCY1.0形態(tài)特性: 多角Interleukin 1β converting enzyme
白介素1家族成員10檢測試劑盒細胞名稱: 人急性T淋巴細胞白血病細胞;Jurkat,CloneE6-1形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Interleukin-1 family member 10
白介素1可溶性受體Ⅱ檢測試劑盒細胞名稱: 人APP-PS1(M146L)雙基因轉(zhuǎn)染CHO細胞株;7WML6.0形態(tài)特性: 多角IL-1sRⅡ
大耳山羊皮膚細胞;LDG-3厭氧菌液體培養(yǎng)基規(guī)格:250g拉丁屬名:Anaerobic Liquid Medium
仔豬副傷寒培養(yǎng)基規(guī)格:1萬毫升用途:用于仔豬副傷寒疫苗
維生素C(抗壞血)規(guī)格:10g詳情介紹
SSDC培養(yǎng)基(ISO)規(guī)格:250g用途:用于小腸結腸耶爾森氏菌的分離培養(yǎng)
支原體半流體培養(yǎng)基基礎規(guī)格:1000ml詳情介紹
無鹽胰胨水規(guī)格:20支用途:用于副溶血性弧菌生化鑒定
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。