需要自備的器材:
1.梅恩君病毒PCR試劑盒步驟儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
特點(diǎn):
1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。?
以下是梅恩君病毒PCR試劑盒步驟的詳細(xì)說明書:
產(chǎn)品名稱 | 梅恩君病毒PCR試劑盒步驟 |
英文名稱 | Main Drain Virus(MDV)RTPCR |
編號 | EY00P784 |
梅恩君病毒PCR試劑盒步驟注意事項(xiàng):
1.基礎(chǔ)程序;
2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;
3.反應(yīng)時(shí)間;
4.循環(huán)次數(shù);
5.PCR 反應(yīng)液的配制;
6.PCR技術(shù)的基本原理;
7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);
8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;
9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
使用方法:
注:梅恩君病毒PCR試劑盒步驟所有試劑使用前需*解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(gè)(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
以下是梅恩君病毒PCR試劑盒步驟的相關(guān)產(chǎn)品,了解更多進(jìn)口PCR試劑盒點(diǎn)擊進(jìn)入。
乳糖亞鹽培養(yǎng)基(LS)250g用于產(chǎn)氣莢膜梭菌確認(rèn)試驗(yàn)
膽硫乳瓊脂(DHL) Deoxycholate Hydrogen Sulfide Lactose Agar 腸道菌選擇性培養(yǎng)基,特別是沙門氏菌的選擇性分離(GB、SN標(biāo)準(zhǔn))
三號膽鹽 No. 3 Bile Salt 100 用于抑制革蘭氏陽性菌的生長
Skirrow瓊脂基礎(chǔ)250g/瓶用于彎曲菌選擇性分離,每培養(yǎng)基中添加20702、20703各添加077%羊血?jiǎng)t組成改良Skirrow瓊脂incubationmediaSkirrow瓊脂基礎(chǔ)250g/瓶用于彎曲菌選擇性分離,每培養(yǎng)基中添加20702、20703各添加077%羊血?jiǎng)t組成改良Skirrow瓊脂
Korser氏枸椽酸鹽肉湯 100g 用于細(xì)菌枸椽酸鹽試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn))
CIN-9cm用于分離小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌
BPL瓊脂 BPL Agar 用于食品中沙門氏菌選擇性分離培養(yǎng)
酵母粉 Yeast extract powder 250克 BR
LAMVAB瓊脂基礎(chǔ)250g/瓶用于乳酸桿菌的分離,每培養(yǎng)基中添加incubationmediaLAMVAB瓊脂基礎(chǔ)250g/瓶用于乳酸桿菌的分離,每培養(yǎng)基中添加1501
大腸菌群快檢紙片(水質(zhì)) 5份/包 用于水質(zhì)檢驗(yàn)
MartinBroth,Modified
瓊脂 250(g) incubation media 瓊脂 250(g)
蠟樣芽孢桿菌計(jì)數(shù)顯色培養(yǎng)基 蠟樣芽孢桿菌計(jì)數(shù)顯色培養(yǎng)基 250克 蠟樣芽孢桿菌快速顯色分離培養(yǎng)
血液增菌培養(yǎng)基250用于從血液中分離病原菌incubationmedia血液增菌培養(yǎng)基250用于從血液中分離病原菌
V-PMedium,Modified
中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1
KIR2DL1 Others Human 人 KIR2DL1 / CD158a 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
ACHN 人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞
Hela-RFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)人細(xì)胞 Hela-RFP-puro (leiviral consuct stable sain) in human cervical cancer cells DMEM+10% FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin
轉(zhuǎn)化生長因子beta超家族
人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞 (HRGEC)( 5×105 ) MEF, 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 Mouse
4T1 小鼠癌細(xì)胞
CL-0439SK-CO-1(人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
4. 淋巴細(xì)胞系統(tǒng)
人細(xì)胞;Hela P10s-11F 大鼠血管外膜成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
人橫紋肌肉瘤細(xì)胞;A-204
ECM1 Others Mouse 小鼠 ECM1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
梅恩君病毒PCR試劑盒步驟MG-63 人成骨肉瘤細(xì)胞
NCI-H460 人肺癌細(xì)胞
MDA-MB-231 人癌細(xì)胞
NCI-H520 人肺鱗癌細(xì)胞