需要自備的器材:
1.鏈球菌屬通用PCR試劑盒步驟儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
特點(diǎn):
1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。?
以下是鏈球菌屬通用PCR試劑盒步驟的詳細(xì)說明書:
產(chǎn)品名稱 | 鏈球菌屬通用PCR試劑盒步驟 |
英文名稱 | Streptococcus spp.PCR |
編號 | EY00P1223 |
鏈球菌屬通用PCR試劑盒步驟注意事項(xiàng):
1.基礎(chǔ)程序;
2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;
3.反應(yīng)時(shí)間;
4.循環(huán)次數(shù);
5.PCR 反應(yīng)液的配制;
6.PCR技術(shù)的基本原理;
7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);
8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;
9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
使用方法:
注:鏈球菌屬通用PCR試劑盒步驟所有試劑使用前需*解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(gè)(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
以下是鏈球菌屬通用PCR試劑盒步驟的相關(guān)產(chǎn)品,了解更多進(jìn)口PCR試劑盒點(diǎn)擊進(jìn)入。
小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元MN-c
MSLN Others Human 人 MSLN / Mesothelin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠胰腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
BALL-1人B淋巴細(xì)胞急性白血病細(xì)胞 BALL-1 B acute lymphoblastic leukemia cells 90%RPMI1640(內(nèi)含2mM L-glutamine)+10%胎牛血清
EGF Protein Canine 重組狗 EGF / Epidermal Growth Facto 蛋白 (His 標(biāo)簽)
SF-295(人XG惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 胎盤羊膜細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
QBC-939, 人膽管癌細(xì)胞 Human
雪羊皮膚細(xì)胞;SSHS1
HA Others H5N9 甲型流感 H5N9 (A/chicken/Italy/22A/1998) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
倉鼠源細(xì)胞 管癌細(xì)胞,T-47D細(xì)胞 B6YH4細(xì)胞,雜交瘤細(xì)胞支原體陽性
人扁桃體上皮細(xì)胞HTEpiC
SFTPD Others Cynomolgus 食蟹猴 SFTPD / COLEC7 / Collectin-7 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照
THP-1(人髓系白血病單核細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
TM3(小鼠間質(zhì)細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
TSCCa(人舌鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
U-2 OS(人骨肉瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
營養(yǎng)肉汁 英文名稱; Nutrient Broth 規(guī)格; 250g
YEP培養(yǎng)基 英文名稱; YEP Medium 規(guī)格; 250g
硫酸鹽還原菌專屬培養(yǎng)基(postgate培養(yǎng)基) 英文名稱; 規(guī)格; 250g
無機(jī)磷培養(yǎng)基(不含瓊脂)(測磷細(xì)菌解磷效能) 英文名稱; 規(guī)格; 250g
克氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基 英文名稱; 規(guī)格; 250g
DTM培養(yǎng)基 DTM Medium 250g
DRBC瓊脂 DRBC Agar 250g
WORT瓊脂 Wort Agar 250g
WORT肉湯 Wort Broth 250g
YGC瓊脂 YGC Agar 250g
鏈球菌屬通用PCR試劑盒步驟發(fā)酵培養(yǎng)基 生化試驗(yàn)培養(yǎng)基,用于細(xì)菌(如金黃色葡萄球菌)發(fā)酵試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))用途用于細(xì)菌發(fā)酵試驗(yàn)。成分(g/L)蛋白胨 10.0g氯化鈉 5.0g 10.0g溴蘭 0.024g粉 5.0gPH值 7.3-7.5用 法稱取本品30克,加熱溶解于1000ml蒸餾水中, 分裝試管,116℃高壓滅菌30分鐘備用。
綠膿菌素測定用假單胞菌瓊脂培養(yǎng)基(PAP) 用于綠膿桿菌的綠膿菌素測定試驗(yàn)用于綠膿桿菌的綠膿菌素測定試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))產(chǎn)品用法:稱取本品59.4克,溶解于1000ml蒸餾水中,115℃高壓滅菌20分鐘,備用。
TTC-吐溫80-營養(yǎng)瓊脂 用于化妝品中細(xì)菌總數(shù)測定(GB標(biāo)準(zhǔn))用途:用于化妝品中細(xì)菌總數(shù)測定。成分(g/L)蛋白胨 20.0浸粉 3.0氯化鈉 5.0 1.0吐溫80 7.0瓊脂 15.0pH值7.1-7.2 25℃用法稱取本品 51.0g,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝每瓶 200ml,121℃高壓高壓滅菌 15 分鐘,冷至 50-55℃時(shí),加入以滅菌 0.5% TTC 液2ml,混勻,備用。0.5% TTC 溶液配制:稱取0.25gTTC 溶解于 50ml 蒸餾水中,121℃高壓高壓滅菌 15 分鐘,裝于棕色瓶中,置 2-8℃保存。
HC瓊脂基礎(chǔ) 用于化妝品中霉菌總數(shù)測定用途:用于化妝品中霉菌計(jì)數(shù)。成分(g/L)胰蛋白胨 2.5月示蛋白胨 2.5酵母浸粉 5.0葡萄糖 20.0 3.5磷酸二氫鉀 3.4氯化銨 1.4鎂 0.06 0.1碳酸鈉 1.0瓊脂 15.0pH值7.0±0.2 25℃用法稱取本品 54.5g,另稱取吐溫 80 20ml,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝,121℃高壓滅菌5 分鐘,備用 。