細(xì)胞名稱 肝癌細(xì)胞;HuH-7
形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 據(jù)說產(chǎn)甲胎蛋白,*α抗體,血漿銅藍(lán)蛋白,纖維蛋白原,纖維粘連蛋白等。
培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法: 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況: PN5
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性
公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
肝癌細(xì)胞;HuH-7 | 貼壁生長 | EY-X63928 |
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將*成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% *和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除*細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用*細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除*細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
碳酐酶3檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 突變型Ca
NADPH;還原輔酶Ⅱ四鈉鹽;(美侖)FGF Receptor 1 AntibodyN-羥基哌啶
帕米膦酸Phospho-FLT3 (Tyr591) (33G6) Rabbit mAb7-硝基四氫喹啉
α,α-二基-哌啶甲Phospho-Histone H3 (Ser10) (D2C8) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 555 Conjuga)2--6-甲基*
葡萄糖氧化酶Phospho-FGF Receptor (Tyr653/654) (55H2) Mouse mAbL-天*-叔丁基酯
*(蛋清)Phospho-FGF Receptor (Tyr653/654) (55H2) Mouse mAb基
HRP;辣根過氧化物酶LATS1 (C66B5) Rabbit mAb5-硝基-2-吡啶羧酸
透明質(zhì)酸酶LATS1 (C66B5) Rabbit mAb2,3,4,6-四酰氧基-alpha-D-吡喃糖溴化物
*(來源于牛肺,*抑制劑)Pan-Keratin (C11) Mouse mAb (Alexa Fluor® 555 Conjuga)2-氨基-5-硝基嘧啶
E-64,蛋白酶抑制劑Pyk2 (5E2) Mouse mAb溴吡啶-2-羧酸
阿齊沙坦酯Phospho-Ephrin B (Tyr324/329) Antibody5-溴-2-吡啶羧酸
α-*Rat (LTF-2) mAb IgG2b Isotype Control (APC Conjuga)羥甲基膦酸二酯
α-*Phospho-LKB1 (Ser428) (C67A3) Rabbit mAb2-基-5-溴甲基吡啶
酰*三鋰鹽DUSP10/MKP5 Antibody2-溴-9-芴酮
尿素酶,脲酶(巨豆)TRPV3 AntibodyN-叔丁氧羰基-2-甲基氨酸
蛋白酶VIIISLFN11 (D8W1B) Rabbit mAb甲基吡啶
*HGK Antibody(R)-Boc-氨基哌啶
*(標(biāo)準(zhǔn)品)AQP2 AntibodyL-2-哌啶酸
β-NADH;還原性輔酶I二鈉鹽Phospho-HSP90α (Thr5/7) Antibody3,5-吡唑二甲酸
蘇拉明鈉MSK1 (C27B2) Rabbit mAb四丁基溴化
彈性蛋白酶Phospho-Stat3 (Ser727) (D4X3C) Rabbit mAb芐基-1-哌碳酸酯
脂肪酶Phospho-Stat3 (Ser727) (D4X3C) Rabbit mAb5-吡啶-2-
木聚糖酶Phospho-CrkII (Tyr221) Antibody5-溴-2-吡啶甲
透明質(zhì)酸,玻尿酸(分子量80萬-150萬)PD-1 (D7D5W) XP® Rabbit mAb (Mouse Specific) (Alexa Fluor® 488 Conjuga)氟吡啶-2-
透明質(zhì)酸,玻尿酸,醣酸(分子量3K)CrkII Antibody氨基-5-甲基吡唑
透明質(zhì)酸,玻尿酸,醣酸(分子量10K)RIP (D94C12) XP® Rabbit mAb(2-甲基)三基溴化膦
透明質(zhì)酸,玻尿酸,醣酸(分子量90K)RIP (D94C12) XP® Rabbit mAb芐基哌啶
透明質(zhì)酸,玻尿酸,醣酸(分子量4K)EA/UBXD8 (D8H6D) Rabbit mAb2-三氟甲酰
*Beclin-1 (D40C5) Rabbit mAb活性二氧化錳
*(標(biāo)準(zhǔn)品)Beclin-1 (D40C5) Rabbit mAb環(huán)氧溴烷
*Cas9 (7A9-3A3) Mouse mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)2,二溴噻吩
過氧化氫酶(牛肝臟)Ingrin β1 (D6S1W) Rabbit mAb3,二溴噻吩
*,*酸Ingrin β1 (D6S1W) Rabbit mAb2,5-二溴噻吩
*(標(biāo)準(zhǔn)品)PHF2 (D45A2) Rabbit mAb2-甲基-2-戊酸
NAD;氧化型輔酶I;β-煙酰腺嘌呤二核苷酸水合物PHF2 (D45A2) Rabbit mAb甲基-羥甲基氧雜環(huán)丁烷
NAD;氧化型輔酶I;β-煙酰腺嘌呤二核苷酸水合物Bcl-2 (D17C4) Rabbit mAb (Mouse Preferred)D(+)-10-樟腦磺酸
β-NADP;β-煙酰腺嘌呤二核苷酸酸;氧化型輔酶 IIBcl-2 (D17C4) Rabbit mAb (Mouse Preferred)溴嘧啶
肝癌細(xì)胞;HuH-7表告依春1072-93-1中文別名:(R)-5-基-2-惡唑啉硫
英文名:Epigoitrin
CAS登錄號:1072-93-1
分子式:C5H7NOS
分子量:129.18
分子結(jié)構(gòu):
外觀:白色針晶()
規(guī)格:20mg/支
純度:≥ 98%
用途:用于含量測定/鑒定/藥理實(shí)驗(yàn)等。
提取來源:*(I. indigotica Fort.)的根
熔點(diǎn):54~56℃
旋光度:+16.0°(c O.53,), ,+16.0°(c0.49,)
藥理藥效:主要用于抗病,治感冒。
貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年