細(xì)胞名稱 卵巢癌細(xì)胞;Caov-3
形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細(xì)胞1976年建系,源自一位54歲白人女性的卵巢腺癌組織。
培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
傳代方法: 1:3~1:8傳代,2~3天換液一次
傳代情況: P42
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 培養(yǎng)法(-)?
產(chǎn)品名稱 | 卵巢癌細(xì)胞;Caov-3 |
生長特性 | 貼壁生長 |
貨號(hào) | EY-X63838 |
產(chǎn)品特點(diǎn):
1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。
2、 可以處理各種細(xì)菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時(shí)間縮短至30分鐘-1小時(shí)。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時(shí),背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時(shí),用0.25%消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生的細(xì)胞,以0.25%消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生的細(xì)胞用消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。
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蛋白C抗體檢測試劑盒細(xì)胞名稱: EB病轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KM0501形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Protein C Antibody
抗波形蛋白抗體檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 馬鐵菊頭蝠皮膚細(xì)胞;S3形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣anti-vimentin antibody
β2糖蛋白抗體檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 棕果蝠肺成纖維細(xì)胞;FFBL3形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣β2-Glycoprotein antibody
載脂蛋白F檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 棕果蝠皮膚成纖維細(xì)胞;FFBS3形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣apoprotein F
γ-谷氨酰基轉(zhuǎn)氨酶5檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人胚胎皮膚成纖維細(xì)胞;HES形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣gamma glutamyl transpeptidase 5
烯酰輔酶A水合酶1檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人皮膚成纖維細(xì)胞;HSAS4形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣Delta(3,5)-Delta(2,4)-dienoyl-CoA isomerase, mitochondrial
蛋白聚糖4檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人肺癌細(xì)胞;A549[A-549]形態(tài)特性: 上皮樣;多角形Proteoglycan 4
前β高密度脂蛋白檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 恒河猴肺細(xì)胞;RM-L1形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣pre-βHigh density lipoprotein
前β1高密度脂蛋白檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 大長舌果蝠肺細(xì)胞;DBL1形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣pre-β1High density lipoprotein
亞基A檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1形態(tài)特性: 上皮樣coagulation factor subunit A
血小板膜蛋白CD41檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠胚胎細(xì)胞;BABL/C-E形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣platelet membrane glycoprotein CD41
CD137分子檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 大長舌果蝠肌肉細(xì)胞;DBM1形態(tài)特性: 上皮樣CD137
酶2檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 豚鼠肺細(xì)胞;GP-F1形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣Glutaminase2
Sestrin 1蛋白檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 豚鼠皮膚細(xì)胞;GP-S1形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣Sestrin 1
L-天門冬氨檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 豚鼠皮膚細(xì)胞;GP-S2形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣L-Aspartic Acid
重組人骨形成蛋白2檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠肺成纖維細(xì)胞;WML2形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣Recombinant human bone morphogenetic protein2
癌易感蛋白檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 豚鼠心肌細(xì)胞;GP-H1形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣Breast Cancer Susceptibility Protein
卵巢癌細(xì)胞;Caov-37-表105454-04-4英文名:7-Epitaxol
英文別名:Benzenepropanoic acid, beta-(benzoylamino)-alpha-hydroxy-, 6,12B-bis(acetyloxy)-12-(benzoyloxy)-2A,3,4,4A,5,6,9,10,11,12,12A,12B-dodecahydro-4,11-dihydroxy-4A,8,13,13-tetramethyl-5-oxo-7,11-metha*H-cyclodeca(3,4)benz(1,2-B)oxet-9-yl ester, (2ar- (2aalpha,4alpha,4abeta,6beta,9alpha(alphar*,betas*),11alpha,12alpha,12aalpha,12balpha))
CAS登錄號(hào):105454-04-4
分子式:C47H51NO14
分子量:853.91
分子結(jié)構(gòu):
外觀:白色結(jié)晶
規(guī)格:20 mg/支
純度:≥ 98%
用途:用于含量測定/鑒定/藥理實(shí)驗(yàn)等。
提取來源:紅豆杉屬植物短葉紅豆杉(Taxus brevifolia)
溶解性:溶于乙醇,,,等有機(jī)溶劑
熔點(diǎn):168~171℃
旋光度:-32.3°()
藥理藥效:抗腫瘤。
貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年