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RPMI 1640培養(yǎng)液是由Moor等研究成功的，最初為培養(yǎng)小鼠白血病細(xì)胞的需要而準(zhǔn)備。開始的配方特別適合懸浮細(xì)胞的生長，主要針對淋巴細(xì)胞，后經(jīng)多次改良從RPMI 1630、1634，而至RPMI 1640。其組成較為簡單，但可以適應(yīng)很多種類細(xì)胞的生長。不僅腫瘤細(xì)胞，而且很多正常組織細(xì)胞可用RMPI 1640進(jìn)行體外培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)室一般將RPMI 1640作為實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞維持的基本培養(yǎng)液，目前RPMI 1640是應(yīng)用最為廣泛的培養(yǎng)基之一。

應(yīng)用：

1、用于人類白血病細(xì)胞懸浮液單層細(xì)胞培養(yǎng)。

2、用于疫苗企業(yè)病毒株的傳代培養(yǎng)供后續(xù)抗原的制備。

3、免疫治療用細(xì)胞培養(yǎng)基礎(chǔ)液。

4、用于動物疫病病毒采樣及病毒分離和維持液的基礎(chǔ)液。

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用 Countess®自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C?；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

1.研究的對象是活細(xì)胞

在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際進(jìn)行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。

3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性

通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。

4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等； 

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對性的研究。

6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)

可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對象。

HCC-LM3人高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞hct116/L人結(jié)腸癌耐細(xì)胞株

HEL人紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞HCT8/Taxol人結(jié)腸癌耐藥株

HFSF人胚胎眼鞏膜成纖維細(xì)胞HO-8910/Taxol人卵巢癌耐藥株

HK-2人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞A2780/Taxol?人卵巢癌耐藥株

HO-8910PM人高轉(zhuǎn)移卵巢癌細(xì)胞K562/Taxol人白血病耐藥株

HOS人骨肉瘤細(xì)胞A549/Adr人肺癌耐藥株

HPAC人胰腺腺泡上皮癌HL-60/Taxol人白血病耐藥株

HT-1080人纖維肉瘤細(xì)胞BIU-87/Adr人膀胱癌耐藥株

HuH-6人肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞SGC7901/Adr人胃耐藥株

HUT102人T淋巴瘤細(xì)胞BEL/Adr人肝癌耐藥株

Hut-78人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞MCF7/Adr人乳腺癌耐藥株

HuTu-80人十二脂腸腺癌HO-8910/ADR人卵巢癌耐藥株

JAR人胎盤絨毛癌細(xì)胞lovo/Adr人結(jié)腸癌耐藥株

JEG-3人絨毛膜癌細(xì)胞A2780/Adr人卵巢癌耐藥株

Jeko-1 人套細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞K562/Adr人白血病耐藥株

jurkat人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞RPMI-1640 培養(yǎng)基HCT8/V人結(jié)腸癌長春新堿耐藥株

KB人口腔表皮樣癌細(xì)胞HL-60/Adr人白血病耐藥株

KG-1急性髓系細(xì)胞白血病細(xì)胞A2780/V人卵巢癌長春新堿耐藥株

LNCaP人前列腺癌細(xì)胞SGC7901/V人胃癌長春新堿耐藥